什麼是蛋白質微陣列?
蛋白質微陣列(Protein Microarray)是一種先進的高通量技術,能同時分析成千上萬種蛋白質的表達、結合能力及功能活性。此技術將大量蛋白質固定在固態基材表面,透過特異性的標記與檢測方法,快速獲取蛋白質間的相互作用與生物活性信息。蛋白質微陣列具備高靈敏度、快速且自動化的特點,成為蛋白質體學研究與臨床生物標記鑑定的重要工具。
蛋白質微陣列的類型
- 分析型微陣列(Analytical arrays):利用抗體或適體作為捕獲分子,專注於蛋白質表達量及結合特性的定量分析。
- 反向相蛋白質微陣列(Reverse Phase Protein Microarray, RPPA):將細胞或組織裂解液點置於芯片上,針對特定蛋白質及其翻譯後修飾狀態進行檢測,常用於疾病標記物發掘。
- 功能型蛋白質微陣列(Functional arrays):固定純化蛋白質,研究其互作活性及酵素功能,模擬生理條件下的蛋白質結構與功能。
蛋白質微陣列的製作流程
- 基材前處理與表面修飾:選擇適合的載玻片或膜材,透過化學修飾(如矽氧烷處理)提升蛋白質的固定效率與活性保留。
- 蛋白質固定:將純化蛋白或裂解液精確點印於基材表面,確保蛋白質保持天然構象與生物活性。
- 標記與檢測:常用螢光標記方法標記目標分子,並以雷射掃描技術讀取螢光信號,量化蛋白質表達及互作。
蛋白質微陣列的應用範圍
- 蛋白質相互作用研究:揭示蛋白質間複雜的互動,包括Protein-Protein、Protein-DNA及Protein-Small Molecular合成。
- 轉譯後修飾分析:如磷酸化、甲基化等修飾的高通量篩選,促進疾病機制理解。
- 生物標記物鑑定:發掘病理狀態下特異性蛋白質標記,應用於癌症與其他疾病的早期診斷與分型。
- 抗體特異性分析:評估抗體的特異性與親和力,提高診斷準確度。
- 臨床癌症蛋白表現篩選:協助定制個體化醫療方案。
- 宿主-病原體互作研究:揭示細菌與宿主間的生物學機制。
常見問題與解答(FAQ)
- 蛋白質微陣列和DNA微陣列有何不同?
- 蛋白質微陣列專注於蛋白質的功能與互作,而DNA微陣列主要用於基因表達或基因序列分析。
- 使用蛋白質微陣列需要哪些試劑和儀器?
- 主要包括蛋白質純化試劑、表面化學處理試劑、螢光標記抗體或探針,及高靈敏度的雷射掃描儀。
- 如何選擇合適的蛋白質微陣列類型?
- 依據研究目標和樣本來源選擇分析型、反向相或功能型微陣列,以達最佳研究效果。
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